光散射法研究糖蛋白及其与蛋白质和抗体的相互作用

报告人: Dan Some博士,怀雅特科技
时间:2017年9月6日

糖蛋白(GPs)是针对多种适应症(包括癫痫病和许多类型的病毒)的中和性和治疗性抗体的主要标靶,许多非IgG治疗蛋白本身就是GPs。因此,GPs的潜在降解物的特性,以及它们与治疗蛋白或靶蛋白的相互作用,对于理解GP靶点和开发有效的治疗方法至关重要。本次网络研讨会介绍了在溶液中进行这些分析的两种基本原理技术:SEC-MALS-UV-RI和CG-MALS

与普通的未修饰蛋白质不同,这些蛋白质在构象上呈球状,表面高度亲水,GPs不能用标准的分析尺寸排阻色谱法准确地表征(SEC)。将SEC与多角度光散射(MALS)和示差(dRI)检测器相结合,形成了一个功能强大的SEC-MALS-UV-RI三重检测系统,该系统可以通过多角度光散射测定蛋白质的摩尔质量和总聚糖质量,从而表征降解物和配合物。组成梯度多角光散射(CG-MALS)利用相同的检测器和一个停止流系统来量化GPs与抗体或可溶性靶蛋白之间可逆结合的绝对化学计量比和结合亲和力。