分子电荷和纳米粒子 zeta 电位是溶质和溶剂的核心特性,与胶体稳定性,化学修饰和其他关键质量有关。
 

了解场流分离系统

非对称流场分离(AF4)

 

非对称流场是一种单相色谱技术,在 Wyatt 的 Eclipse™ Dualtec™ and Eclipse™ AF4™ 系统中实施。在非常薄的流动空间中施加垂直于该流向的力场可实现高分辨率的分离。流动和样品被限制在一个通道内,该通道由两个用间隔箔隔开的板组成;然后用螺栓将板固定在一起。间隔箔的典型厚度为100至500μm。

上通道板是不可渗透的。但,底部通道板是可渗透的,并且由多孔玻璃料材料制成。典型尺寸为10 kDa的超滤膜覆盖底板,以防止样品穿过通道。

在流动通道内,由于液体的层流,形成了抛物线形的流动轮廓:与通道中心处的流速相比,边缘液体的移动更慢。当垂直力场施加到流动的层流上时,分析物被驱向边界层,即通道的所谓“accumulation wall”。

与布朗运动相关的扩散反过来会产生抵消运动。具有较高扩散速率的较小颗粒倾向于在通道中更高的位置达到平衡位置,在通道中纵向流动更快。因此,在通道内流动的速度梯度分离了不同大小的颗粒。

较小的颗粒比较大的颗粒沿通道传输更快。这导致较小的颗粒先于较大的颗粒洗脱,这与大分子首先洗脱的尺寸排阻/凝胶渗透色谱(SEC / GPC)分离相反。

使用AF4分离时,没有柱介质与样品相互作用,因此对于摩尔质量非常高的聚合物,无需担心会施加剪切力。整个分离过程温和,快速且无损,没有可能相互作用,降解或改变样品的固定相。

分离过程需要三个步骤:在前两个步骤(注射和聚焦)中,主流被分开,从两端进入扁平通道,并在注射口下方达到平衡。在这一点上,流动相将仅向下移动并渗透穿过膜。当样品被注入时,它被聚集在一个很薄的带中,并向膜集中。样品体积完全转移后,停止注射流,通常在切换至洗脱模式之前需要等待一分钟的聚集时间。现在,流动相仅从入口进入,并在连接到检测器的出口处流出。样品成​​分根据大小洗脱分离,并由检测器阵列监控。

中空纤维场流分离系统(HF5)

中空纤维FFF通道的工作原理与AF4的原理非常相似,不同之处在于不再有上盖板-滤膜已经被卷成管装。 这样的结构允许非常小的通道体积,从而导致灵敏度提高和运行时间缩短。