粒子浓度

MALS 最常与基于尺寸的分离方法（例如尺寸排阻色谱 (SEC-MALS) 或场流分离 (FFF-MALS)）结合使用。测量前的分离可实现半径为 13 nm 至 650 nm（相当于 rms 半径范围为 10 nm 至 500 nm）的高分辨率粒径分布，其中分辨率主要受分离方法的限制。

由于每个尺寸分数都是单独测量的，因此检测器不会因大颗粒的强散射而对小颗粒“视而不见”，因此浓度值通常非常准确。如果由不同材料组成的粒子被分离，则每个峰都可以被分配一个对应的 n_particle 值。 SEC-MALS 使用带有 DAWN^® MALS instrument 的标准 HPLC 系统； FFF-MALS 添加了 Eclipse^™ FFF controller 和分离通道。 ASTRA^® software 分析每个洗脱部分的粒径和浓度，并可以积分峰计算每个粒径范围内的进样颗粒总数。 ASTRA 支持 21 CFR Part 11 compliance ，VISION^™ FFF software 也是如此。

除了尺寸和浓度之外，还可以为设置配置紫外、荧光或折光率检测器，以确定许多类型纳米粒子的摩尔质量、组成和有效载荷。

Real-time MALS (RT-MALS) 浓度测量通常在不分离的情况下进行，以便为过程分析 (PAT) 应用提供快速反馈，每分钟报告 30 次结果。可以对这些值进行积分以计算例如汇集级分中的病毒粒子的最终滴度。同时，不断确定尺寸以用作生物制品 DSP 汇集标准或监测制造过程中合成纳米颗粒的偏差。

The ultraDAWN^™ RT-MALS instrument 通常与以较低流速运行的生产或纯化系统串联连接。对于静态反应器或高流速过程，它是在线配置的，其中一个泵抽取一些产品并将其运行通过ultraDAWN。 OBSERVER^™ software 协调整个过程；可以设置预定义的触发条件，以在到达终点或偏离可接受的产品属性时提醒操作员。

RT-MALS 仅确定平均尺寸而不是完整分布，因此如果尺寸分布较宽，则颗粒浓度值可能不准确。报告的浓度对于窄分散的纳米粒子是最可靠的。

DLS 通常在没有分离的情况下在微量比色皿或微孔板中进行。这种“单机处理”模式操作可以快速测量相对低分辨率的分布，精度低于 SEC-MALS 或 FFF-MALS，但可能高于 RT-MALS。微孔板中的高通量 DLS 是分析病毒载体下游生物过程组分或纳米颗粒制剂基质的理想选择。

DynaPro^® Plate Reader 中可测量浓度的大小范围（流体动力学半径）为 0.5 nm 至 160 nm，DynaPro^® NanoStar^® 中为 0.2 nm 至 175 nm，使其适用于大多数病毒和纳米药物以及其他纳米粒子的种类。如果分布中明显有不止一种规模的种群，DYNAMICS^® software 将提供每个种群的浓度。

Wyatt 的 DLS 仪器极大地减少了样品需求。一次性比色皿只需要 2 µL 样品，而在最常见的 384 孔板中，最佳测量需要 20 µL。尽管这些仪器涵盖了几个数量级的浓度，但如果粒子浓度很高并且需要稀释，则可以很容易地直接在测量体积中进行。

DLS 对于快速简便的纳米颗粒分析特别有用，而且仪器的复杂性或样品制备工作量最少。 Wyatt 的 DLS 仪器得到 DYNAMICS^® software 的支持，这是一套全面的仪器控制、数据采集和分析套件，可提供广泛的自动化、丰富的表征功能以及对每次测量的质量和可靠性的直观反馈。

为了用于质量控制和在线过程分析，DYNAMICS 提供 21 CFR Part 11 compliance。 此外，它还支持应用程序编程接口 (API)，可与第三方液体处理程序和高级流程或质量控制软件集成。