常规尺寸排阻色谱法依赖于不能准确代表您分子的参考标准。 SEC-MALS可以直接测量摩尔质量，而与洗脱时间无关，以确保报告值可信。
 

尺寸排阻色谱与多角度光散射联用（SEC-MALS）

并非所有大分子的构象都相同。 您的样品可能具有与标准品分子不同的构象，或可能存在不同的色谱柱相互作用。 作为确定溶液中摩尔质量和均方根值 Rg 的绝对技术，SEC-MALS（尺寸排阻色谱与多角度光散射分析的结合）克服了色谱柱校准的局限性。

Wyatt MALS 检测器是目前实验室表征蛋白质，生物聚合物和合成聚合物的标准配置，它通过功能强大的 ASTRA 软件提供的可靠且强大的测量非常具有价值。

将一台或多台 Wyatt 检测器，以及经过 MALS 认证的 SEC 色谱柱和软件添加到您喜欢的分析HPLC系统中，以表征：

  • 异构生物聚合物和合成聚合物
  • 低聚物和高聚物
  • 偶联物，例如ADC聚乙二醇化蛋白或嵌段共聚物
SEC Beam

多角度静态光散射（MALS）需要精确对准光束方向，激光偏振和探测器位置，以便提供准确的测量结果。

摩尔质量

多角度静态光散射（MALS）需要精确对准光束方向，激光偏振和探测器位置，以便提供准确的测量结果。

应用文摘

 抗体结合物（ADC）分析

 聚乙二醇化蛋白

 晶状体蛋白的构象变异

 血红蛋白的洗脱特性

 普通肝素

 更多应用

部分文献

Folta-Stogniew, E. Oligomeric states of proteins determined by size-exclusion chromatography coupled with light scattering, absorbance, and refractive index detectors. Methods Mol. Biol.  2006, 328, 97-112.

Laurén, J.; Gimbel, D. A.; Nygaard, H. B.; Gilbert, J. W.; Strittmatter, S. M. Cellular prion protein mediates impairment of synaptic plasticity by amyloid-β oligomers. Nature  2008, 457, 1128-1132.

Ren, X.; Kloer, D. P.; Kim, Y. C.; Ghirlando, R.; Saidi, L. F.; Hummer, G.; Hurley, J. H. Hybrid structural model of the complete human ESCRT-0 complex. Structure  2009, 17, 406-416.

Tarazona, M. P; Saiz, E. Combination of SEC/MALS experimental procedures and theoretical analysis for studying the solution properties of macromolecules. J. Biochem. Bioph. Meth.  2003, 56, 95-116.

Zhang, M.; Zhang, L.; Cheung, P. C. K.; Dong, J. Fractionation and characterization of a polysaccharide from the sclerotia of Pleurotus tuber-regium by preparative size-exclusion chromatography. J. Biochem. Bioph. Meth.  2003, 56, 281-289.

搜寻文献

有关 SEC-MALS 的相关仪器

MALS 检测器

dawn-heleos-II, sec-mals, size exclusion chromatography, protein aggregation, polymer analysis, polymer molecular weight

DAWN® - 最灵敏的MALS探测器。配备18个角度的探测器，用以确定 200 Da ~ 1 GDa 摩尔质量和10 ~ 500 nm半径的分子。

  • 标准选项：常温型
  • 制冷/加热型：-15 ~ 150 ℃
  • 超高温型：20 ℃ ~ 210 ℃

DAWN提供了处理荧光样品的特殊信号：荧光屏蔽滤光片和785nm的红外激光。


miniDAWN® - 3角度光散射探测器，用以测定200 Da ~ 10 MDa摩尔质量和10–50 nm半径的分子（仅限环境温度）。

microDAWN™ - 第一个为UHPLC打造的 MALS探测器，探测器间的分散度低至1.5 µL。采用3角度探测器，测定200 Da ~ 20 MDa摩尔质量和10-50 nm 半径的分子（仅限环境温度）。

示差折光检测器

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Optilab® - 一种独特的在线示差折光检测器，用于测量任何大分子的浓度，且不受发光基团的影响。温度可以在4°C ~ 65°C之间调节。同时，它可以测量高达180 mg/mL蛋白质溶液的浓度。

microOptilab™ - 第一个专门设计用于所有UHPLC系统的RI探测器。

粘度检测器

ViscoStar® - 是一种高度灵敏的在线粘度检测器，与SEC-MALS一起用于测定所有类型的生物大分子、合成聚合物甚至蛋白质和多肽的大小和构象。

ViscoStar采用多种新技术，为各种GPC提供最高灵敏度、稳定性和溶剂兼容性的粘度检测器。它的易用性和可维护性使其成为Wyatt's DAWN®光散射检测器和Optilab®示差检测器的完美伴侣。温度控制在4°C ~ 70°C之间。

microViscoStar™ - 与ViscoStar类似，但专门设计用于UHPLC/APC。

软件

ASTRA® - 表征大分子和纳米颗粒的高端软件。用于色谱、FFF或单机处理模式下的MALS和DLS分析。ASTRA提供21CFR（11）兼容版本，并提供其他选项，如粒子分析。同时，提供多种类型的构象分析，包括构象图、Mark Houwink Sakurada参数和形状因子。

"Most versitile SEC detector on the market - great product."
"I have been using MALS since the 1980's - Wyatt's have always been the best value. This latest is very user-friendly. The combined information from the MALS and the viscometry detector can't be beaten. Branched co-polymers are no problem; great for pH." Mary Baker, MCPS

"Without this lot quality control checks for the product would have not possible."
"This is the only technology available for absolute molecular size determination with ease of use. It is highly reproducible and recommended for polysaccharide and conjugate vaccine manufacturers." Rajendar Burki, Biological E Limited

"Great machine, one must have it in a lab for characterizing polymers."
"It is a fantastic MALS detector, easy to use and vary reliable. I have used/seen this detector in many labs, always happy to work with this MALS detector." Yonggang Liu, Changchun Institute of Applied Chemistry

"An absolute must for today’s protein biochemist"
"This instrument is perfect for understanding protein/detergent complexes and ascertaining the stoichiometry of protein/protein complexes. Wyatt also offer an excellent training course which is backed up by an excellent support team who are always on hand to help out." George Orriss, University of Manitoba

如果您对其他技术或将其他技术与 SEC-MALS 联用感兴趣，请看：

FFF-MALS: 将FFF系统耦合到 Wyatt MALS 或 DLS 检测器可创建一个功能强大的系统，可对简单或复杂样品的摩尔质量和大小分布进行准确，可靠的表征。

CG-MALS: 应用 CG-MALS 来表征自我和异缔合，从 pM 到 mM 的结合亲和力，绝对分子化学计量（不仅仅是摩尔比）等。

DLS: 通过量化散射光中的动态波动来测量溶液中纳米粒子和胶体的平移扩散系数Dt。 DLS 适用于 0.2 nm ~ 5,000 nm Rh 的测量。

MP-PALS: Wyatt Technology 的突破性大规模平行相分析光散射（MP-PALS）将强大的 ELS 测量扩展到了天然缓冲溶液中的蛋白质和其他生物分子。 MP-PALS可以做传统zeta电位仪可以做的所有事情，甚至更多。

SEC-IV: SEC-IV 可能是表征某些不适合使用 SEC-MALS 分析的材料的最佳方法。通过简单地添加 DAWN，将基本的 SEC-IV 设置转换为功能强大的 SEC-MALS-IV 聚合物表征站，即可分析摩尔质量和尺寸的绝对测定，而无需考虑构象，支链聚合物，共聚物并从头测量Mark-Houwink系​​数。