基于脂质纳米颗粒（LNP）的药物运载在新的基因疗法、肿瘤学和有效、快速反应的疫苗领域具有很大的前景。在研发、生产和质量控制过程中表征和量化LNP属性的平台技术将有助于实现这一承诺。
Wyatt 用于分析关键 LNP 质量属性的解决方案包括：
- 平均尺寸，多分散性和详细的尺寸分布
- 颗粒浓度
- 基于尺寸的核酸（NA）有效载荷分布
- 各种压力下的稳定性
其中许多测定可以简化和自动化以实现高通量。
光散射技术易于操作并提高生产力，同时直接定义这些 CQA 的核心生物物理特性。 继续阅读以了解 Wyatt 针对 LNP 和其他纳米药物的行业和监管需求的解决方案。
Wyatt 的产品表征病毒和非病毒基因载体。出版物列表PL9008: 通过光散射表征基因载体的关键出版物列出了一些同行评审的出版物。
观看网络会议“大小、浓度、有效载荷和质量：通过光散射对 LNP-RNA 疗法的综合表征”。
粒度分布
粒径影响生物分布和细胞吸收，且还是 LNP 最重要的特性之一。多角度和动态光散射（MALS、DLS）用于 LNP 开发、生产和质量控制的不同阶段。
配方开发和质量控制
快速筛选配方条件以生产所需尺寸范围和浓度的 LNP，可减少人工、提高产品一致性并加快上市时间。使用 DynaPro® Plate Reader (DPR) 的高通量 DLS 测量标准 96、384 或 1536 孔板中的尺寸和颗粒浓度，在不牺牲准确性或灵敏度的情况下提供最大的便利性和最低的耗材成本。
FFF-MALS 高分辨率测量尺寸分布
与多角度光散射 (FFF-MALS) 联用的场流分级分离是准确和定量 LNP 尺寸分布的首选方法，可提供其他方法无法实现的详细程度、准确性、可重复性和自动化水平。 FFF-MALS 对 LNP 开发监管方面的影响由 Fanny Caputo 博士在网络研讨会上通过多检测器不对称流场流分离测量 RNA 递送的脂质体和 LNP 的物理特性进行了介绍。
ASTRA 的数密度方法可直接测量源自光散射强度的粒径和浓度。这些计算可以应用于各种常见的基因传递载体，包括病毒、病毒样颗粒和脂质纳米颗粒。在 CDC 科学家发表的这篇论文中了解有关此方法的灵敏度和线性度的更多信息：使用场流分馏和多角度光散射对甲型流感病毒颗粒进行定量分析。
Wyatt 用于表征各种基因治疗产品的解决方案在《生物制剂和复杂药物的表征》手册中进行了描述。
使用 FFF-MALS 可以确定的不仅仅是尺寸分布。 FFF-MALS 在脂质体和 LNP 表征中的各种应用，包括脂质体的临床前表征以及纳米载体和细胞膜之间的药物转移动力学，在视频会议脂质纳米颗粒药物制剂的表征和 《WP2608：使用 FFF-MALS 进行脂质纳米颗粒和脂质体表征》中进行了介绍。
通过 DLS 测量的三种LNP制剂的尺寸分布。
场流分离（FFF）根据扩散系数即流体动力学半径分离颗粒。
通过 FFF-MALS 测量的相同三种LNP制剂的尺寸分布。
量化有效载荷
在 SEC 或 FFF 之后通过 MALS-UV-dRI 进行在线有效载荷分析
ASTRA 的 LNP 分析模块使用与 SEC 或 FFF 耦合的在线 MALS、UV260 和 dRI 检测器对核酸重量分数进行定量。相同的数据同时量化了许多其他质量属性，例如尺寸分布、颗粒浓度、形态、封装效率、mRNA 浓度和脂质浓度。该方法在“在线确定基于脂质纳米颗粒的RNA制剂的尺寸依赖性RNA含量”中针对传统的离线测量进行了验证。
FFF-MALS-UV-dRI 系统
尽管 SEC 可以用于分离 LNP，但 FFF 是 LNP 和其他 bioNPs 的首选工具，因为它具有可调的分辨率和更好的回收率。 Wyatt 用于 LNP 有效载荷分析的 FFF-MALS 系统包括 Eclipse™ FFF 仪器、DAWN® MALS 仪器（带有嵌入式 WyattQELS™ DLS 模块）、Optilab® 差示折光率 (dRI) 检测器和来自安捷伦科技的 HPLC 泵、自动进样器和 UV 检测器。同时，可以在下游添加馏分收集器。
整个系统由 Wyatt 用于 FFF 方法设计和仪器控制的创新软件 VISION™ 精心设计。使用 MALS 和 DLS 的首要软件 ASTRA® 收集和分析数据。 VISION 和 ASTRA 均提供符合 21 CFR Part 11 的版本。
Wyatt 的产品和应用范围涵盖了大分子和纳米粒子表征的解决方案。
Wyatt 的 FFF-MALS 系统包括 Eclipse、DAWN 和 Optilab。 底部最前面的是 Eclipse 分离通道。
LNP 的工艺分析技术
LNP 过程开发和分析
在开发了成功的 LNP/mRNA 平台后，实时多角度光散射 (RT-MALS) 将促进该过程的扩大。通过联机或在线的 ultraDAWN™，可以实现对颗粒大小和浓度等关键质量属性的连续监测。《AN8006：通过 RT-MALS 在线监测脂质体大小》中描述了在生产环境中实时监测脂质体大小的方案。
PAT 的实时 MALS
RT-MALS 可在工艺开发过程中应用，以免对 DLS 或粒子跟踪分析 (PTA) 进行耗时的离线测量，以及在完整的 GMP 生产过程中监控和标记潜在偏差。在 GMP 操作中，OBSERVER™ RT-MALS 软件成为一个 OPC-UA 服务器，以便与过程控制集成。了解更多信息，请查看网络会议实时过程分析和控制疫苗纳米颗粒和大分子或获取 ultraDAWN 手册。
