使用CG-MALS分析埃博拉病毒糖蛋白及其与治疗性抗体的相互作用

报告人:Kathryn Hastie博士,Scripps研究所;Daniel Some博士,首席科学家
现场演示:2017年3月15日

埃博拉病毒(EBOV)糖蛋白(GP)对于病毒和宿主细胞膜的附着和融合至关重要。它也是中和和治疗性抗体反应的主要靶标。 EBOV GP被发现是病毒表面的三聚体复合物。在设计疫苗或进行暴露后抗体治疗时,是否有多种抗体与这些复合物结合以及具有何种亲和力是至关重要的信息。

使用成分梯度多角度光散射(CG-MALS)来量化表观重均摩尔质量Mw)随成分变化的函数,我们分析了EBOV GP与中和或保护性抗体之间的可逆关联。使用这种技术,我们能够确定各种免疫复合物的亲和力和化学计量,以及每种复合物的相对数量。 CG-MALS数据的最佳拟合模型得到了使用cryoEM进行结构表征的支持(Pallesen, et al. Nature Microbiology, 2016)。

该网络会议将解释我们如何使用SEC-MALS表征EBOV GP的聚糖含量和低聚状态,并展示我们可以使用CG-MALS获得的有关GP抗体相互作用的详细信息。该网络研讨会将讨论用于光散射研究的蛋白质的制备以及仪器的设置和数据分析。同时还会将使Wyatt光散射仪器的用户能够设置和执行自己的SEC-MALS和CG-MALS实验,并严格评估结果数据。