
通过三重检测更好的进行表征
将多角度静态光散射(MALS),差示粘度法(dVI)或动态光散射(DLS)和差示折光法(dRI)结合使用的三重GPC检测可以对以下各项进行定量分析:
- Mark-Houwink-Sakurada参数
- 构象(无规线团,分支,球状)
- 支化比,聚合物和树枝状分子中每个分子的分支
- 蛋白质聚集体或淀粉样原纤维的形状
- 空心或实心的载体纳米颗粒

DAWN®
最灵敏的MALS检测器,结合18个角度的激光检测器来确定200 Da ~ 1 GDa摩尔质量和10 – 500 nm半径的分子。
Optilab®
独一无二的在线差示折光检测器,用于测量任何大分子的浓度,且与有色基团无关。 高浓度的Optilab可检测高达180 mg / mL的蛋白质浓度。
ViscoStar®
高灵敏度的在线差分粘度计,与SEC-MALS结合使用,可确定所有类型的生物聚合物,合成聚合物甚至蛋白质和肽的大小和构象。 ViscoStar融合了多种新颖技术,可为任何GPC粘度计提供最高的灵敏度,稳定性和溶剂兼容性。 它的易用性和可维护性使其成为Wyatt的DAWN光散射和Optilab折射率检测器的理想伴侣。
不需要假设的测量方法
尽管有很多方法可以确定蛋白质,生物聚合物和合成聚合物等大分子的摩尔质量或分子量,但只有一种方法可以快速有效地确定溶液中的绝对分子量:多角度静态光散射(MALS)。 MALS结合了对光散射强度和浓度的精确测量,可以对溶液性质的分子量进行严格的第一性原理计算,而无需假设其构象或形状,也不会干扰样品。 点击了解有关绝对表征的更多信息以及确定结果的方式。

尽管色谱柱校准表明血红蛋白比BSA小得多,但MALS表明它们确实具有相似的摩尔质量。 血红蛋白的多分散性(此处被视为峰的尾随分子量降低)归因于单体,二聚体和四聚体之间的动态平衡。
分支
设计和控制聚合物支化可以帮助创造许多具有新的机械,热学和流变学性质的合成材料。 评估所有类型聚合物中支链的最可靠方法是多角度光散射,例如Stepan Podzimek博士在“Branching Revealed: Characterizing Molecular Structure in Synthetic and Natural Polymers by Multi-Angle Light Scattering”中所表明的观点。(应用说明 或 在线观看视频)。
支化比是通过摩尔质量和大小之间的关系确定的; 两者均通过与尺寸排阻色谱法(SEC-MALS)或场流分级分离(FFF-MALS)耦合的多角度光散射确定。 半径小于10 nm的分子需要使用ViscoStar差示粘度计来确定尺寸,或者需要将嵌入MALS检测器中的WyattQELS动态光散射模块用于尺寸测量。

图1. 通过比较直链聚苯乙烯和支链聚苯乙烯构象图来分析支化。
虽然SEC-MALS适用于多种聚合物,但使用Eclipse DualTec或Eclipse AF4的FFF-MALS比SEC具有许多优势。使用FFF的分离方法对于从SEC柱上异常洗脱的某些大的、高度支化的聚合物是必要的。

图2. 丙烯酸共聚物的均方根半径与洗脱体积曲线。SEC-MALS分离显示异常洗脱。

图3. FFF-MALS(蓝色)克服了SEC-MALS(红色)中某些大的高度支化聚合物所显示的异常洗脱和异常构象图。
构象
即使聚合物没有分支,有关构象的信息也可以在摩尔质量和尺寸之间的关系中或者在均方根半径rg与流体动力学半径rh之比之间获得。

图4. 聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、纤维素棒和透明质酸在不同的构象下表现出不同的斜率。

图5. 不同构象下质量与半径的理论关系。
