DYNAMICS 的优势
尺寸和尺寸分布–基础知识
将平均尺寸报告为半径,直径或扩散系数,并将峰宽报告为多分散度,多分散百分数或多分散指数(PDI),所有这些均通过DLS测量。
累积量的方法用来确定平均大小和多分散性。 DYNAMICS根据ISO 22412和ASTM 2490-09中指定的累积量算法报告粒度。或者,选择专有的累积量计算以进行高级拟合。
具有高多分散性的样品表明存在聚集体或多种物质。正则化是一种非负最小二乘(NNLS)拟合算法,可解决大小相差3-5的总体。可以根据%Intensity,%Mass或%Number分布来计算和显示分布。
对于较宽的尺寸分布,重要的是要了解整个分布,而不是仅了解平均半径。 DYNAMICS使用D10,D50和D90(样本大小分别低于整个分布的10%,50%和90%)的值来提供累积大小分布(直径或半径)的计算。分布的宽度也定义为(D90-D10)/ D50。
摩尔质量
DynaPro® Plate Reader III或DynaPro® NanoStar®帮助测量蛋白质和小聚合物的绝对摩尔质量(分子量)。
同时进行的摩尔质量和尺寸测量的组合,决定了分子构象,并且可以区分由于蛋白质折叠和聚集引起的尺寸变化。
图中显示了一个蛋白质展开的例子。由DLS测得的半径从2 nm变为2.6 nm。从40℃到85℃的恒定摩尔质量和多分散性(%PD)表明,加热后的尺寸增加是由于展开而不是聚集。
对于绝对摩尔质量分布或高分子量聚合物的测量,我们建议使用我们的多角度光散射仪器与尺寸排阻色谱(SEC-MALS)系统。
Zeta电位和电荷
在电泳光散射中,DYNAMICS不会阻挡任何东西,支持最常见的模型-Henry,Hückel和Smoluchowski-根据样品和溶液条件计算Zeta电势。
结合DLS的Rh(同时测量),还可以计算出颗粒上的净电荷和有效电荷。
此外,DYNAMICS还报告了电导率,Debye长度和亨利函数的值。
滴度
每毫升颗粒的数量是开发用于治疗,诊断和其他用途的纳米颗粒的关键信息。 DYNAMICS通过结合DLS和SLS来计算颗粒浓度:动态光散射确定颗粒大小,再加上材料的折射率和总散射强度,就足以量化浓度。
如实验中所示,几微升样品和几秒钟的测量时间就足以确定腺相关病毒的单体和聚集体的粒径和浓度。 测试多种血清型,评估过程参数或评估储存缓冲液的稳定性非常容易。
热稳定性
监控蛋白质的融解和展开,确定临界胶束温度(CMT)或研究热响应性聚合物和胶体。 DYNAMICS确定Tonset,Tagg和Tm以及平均尺寸。
每个分子的行为都不同。 因此,DYNAMICS提供了以下方面的分析:聚集样品的起始转变温度,S型(中点)构象变化(例如蛋白质展开)以及其他多项式分析。
胶体稳定性
非特异性蛋白质间相互作用是选择候选生物治疗剂(例如IgG)和优化其制剂的关键。
通过测量和分析浓度系列,可以确定A2(来自静态光散射)和kD(来自动态光散射)。
该实验显示了在不同缓冲液和盐条件下抗体制剂的kD分析。 kD的正值表示制剂的稳定性。
浓度分析
通过DYNAMICS的浓度依赖性分析确定临界胶束浓度(CMC)和其他浓度依赖性尺寸变化。
该实验显示了两亲聚合物的浓度依赖性大小。 在DynaPro Plate Reader中一式三份测量每种浓度。 定义为过渡的中点的CMC为0.04 mg / mL,半径为1.7 nm。
满足各种需求的参数分析
在分析样本趋势时没有任何限制:使用“自定义参数分析”分析任何过渡。 选择参数对,例如半径对pH值或Zeta电位对盐浓度。 如图所示,可以分析热响应性聚合物。
粘度计算
高浓度蛋白质制剂的溶液粘度通过测量已知尺寸的示踪剂颗粒的扩散来确定。 在DYNAMICS中,只需指定标准尺寸颗粒的流体力学半径(在此示例中为250 nm),将“粘度计算”设置为“使用内标”,就会计算出配方的粘度并将其显示在数据表中。
浊度
溶液的浊度由浊度校准图(turbidity calibration plot)测定。 石英比色杯根据一系列浊度标准进行校准,随后在该比色杯中溶液的浊度测量结果被计算并以浊度单位 (NTU) 显示在数据表中。
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