场流分级系统(FFF)是一种通用的分离技术,克服了 SEC 的许多限制。 与 MALS 或 DLS 结合使用可获得大分子和纳米颗粒的绝对摩尔质量和大小。
 

FFF-MALS

非对称流场流(AF4)和中空纤维流场流(HF5)是两种不同的分离方式,与其他分离技术相比,具有许多优势:

  • 分离大分子和纳米颗粒1 nm ~ > 1 µm
  • 消除可能使易碎样品降解的色谱柱剪切力
  • 避免与色谱柱填充珠发生不利相互作用

将 FFF 系统耦合到 Wyatt MALS 或 DLS 检测器可创建一个功能强大的系统,可对简单或复杂样品的摩尔质量和大小分布进行准确的表征:

  • 脂质体,病毒样颗粒或非活性病毒
  • 全类型血清
  • 食品工业中的纳米颗粒和生物聚合物
  • 环境纳米粒子
  • 异构生物聚合物和合成聚合物
  • 低聚物和聚合物
  • 偶联物,例如ADC,聚乙二醇化蛋白或嵌段共聚物

Instrumentation for FFF-MALS

场流分离系统

eclipse-dualtec

非对称流场分离系统(AF4)和中空纤维流场分离系统(HF5)可以对直径为1nm ~ 10000nm的大分子和纳米粒子进行多功能分离。结合MALS和DLS仪器,FFF分离是获得溶液中摩尔质量和分子尺寸分布的理想方法。

Wyatt提供完整的 FFF-MALS 解决方案,或者可以将 Eclipse 模块集成到您现有的LC系统中。

Eclipse™ DualTec™ - Tip-injection FFF流体控制系统,它与您的高效液相色谱泵和自动进样器集成,在不丧失SEC功能的情况下提供FFF的所有优点。支持AF4、HF5和SEC中任意两个之间的切换。

Eclipse™ AF4™ - Center-downstream injection FFF流体控制系统,与HF5或SEC配合使用时不需要进行优化。Fritless Channel 和 semi-preparative FFF 在使用时必需要基于AF4。

MALS 检测器

dawn heleos, fff-mals

DAWN® - 最灵敏的MALS探测器。配备18个角度的探测器,用以确定 200 Da ~ 1 GDa 摩尔质量和10 ~ 500 nm半径的分子。

  • 标准选项:常温型
  • 制冷/加热型:-15 ~ 150 ℃
  • 超高温型:20 ℃ ~ 210 ℃

DAWN提供了处理荧光样品的特殊信号:荧光屏蔽滤光片和785nm的红外激光。


miniDAWN®
- 3角度光散射探测器,用以测定200 Da ~ 10 MDa摩尔质量和10–50 nm半径的分子(仅限环境温度)。

动态光散射检测

WyattQels, fff-mals

WyattQELS™ - 一种动态光散射(DLS)模块,它集成在 DAWN 或 miniDAWN MALS探测器中,在相同的散射体积下提供同时的DLS测量。

示差折光检测器

optilab-t-rex, fff-mals

Optilab® - 一种独特的在线示差折光检测器,用于测量任何大分子的浓度,且不受发光基团的影响。温度可以在4°C ~ 65°C之间调节。同时,它可以测量高达180 mg/mL蛋白质溶液的浓度。

软件

ECLIPSE - 控制 Eclipse DualTec和 AF4 场流分馏(FFF)系统。结合 ASTRA 进行数据收集和分析,ECLIPSE 为用户提供了一个大分子表征的交钥匙解决方案。

ASTRA® - 表征大分子和纳米颗粒的高端软件。用于色谱、FFF或单机处理模式下的MALS和DLS分析。ASTRA提供21CFR(11)兼容版本,并提供其他选项,如粒子分析。

"Easy to use"
"We used Wyatt Eclipse AF4 coupled with online MALS and DLS for liposome, nanoparticle, and other formulation characterization. It is easy to use, and is able to produce high quality results." Yingwen Hu, Leidos Biomedical Inc.

"Without this lot quality control checks for the product would have not possible."
"This is the only technology available for absolute molecular size determination with ease of use. It is highly reproducible and recommended for polysaccharide and conjugate vaccine manufacturers." Rajendar Burki, Biological E Limited

"This instrument has proved invaluable for the analysis of very difficult samples."
"This system is able to separate ultra high molecular weight polymers as well as highly branched polymers. Additionally, we are able to determine the radius of different sized nanoparticles and colloids." Stacy Lewis, 3M (Pace Analytical)

"I had good results"
"Asymmetrical flow field-flow fractionation when connected to suitable detector such as multi-angle light scattering (MALS) has shown to be a great technique for the analysis molar mass and root mean square of many food macromolecules. The results are reproducible and with good quality." Catalina Fuentes, Lund University

如果您对其他技术或将其它技术与 FFF 联用感兴趣,请看:

SEC-MALS: Wyatt MALS 检测器是所有蛋白质,生物聚合物和合成聚合物表征实验室的标准配置,可提供可靠,强大的测量价值。

CG-MALS:应用 CG-MALS 来表征自我和异缔合,从 pM 到 mM 的结合亲和力,绝对分子化学计量(不仅仅是摩尔比)等。

DLS: 通过量化散射光中的动态波动来测量溶液中纳米粒子和胶体的平移扩散系数Dt。 DLS 适用于 0.2 nm ~ 5,000 nm Rh 的测量。

MP-PALS: Wyatt Technology 的突破性大规模平行相分析光散射(MP-PALS)将强大的 ELS 测量扩展到了天然缓冲溶液中的蛋白质和其他生物分子。 MP-PALS可以做传统zeta电位仪可以做的所有事情,甚至更多。

SEC-IV:SEC-IV 可能是表征某些不适合使用 SEC-MALS 分析的材料的最佳方法。通过简单地添加 DAWN,将基本的 SEC-IV 设置转换为功能强大的 SEC-MALS-IV 聚合物表征站,即可分析摩尔质量和尺寸的绝对测定,而无需考虑构象,支链聚合物,共聚物并从头测量Mark-Houwink系​​数。