DAWN

タンパク質、コンジュゲート、高分子、ナノ粒子の絶対的なキャラクタリゼーションを行うための、世界最先端の光散乱装置です。

プレミアMALS

DAWN®は、溶液中の高分子やナノ粒子の分子量とサイズを絶対的にキャラクタライズするための最高峰の多角度静的光散乱(MALS)検出器です。DAWNは、最高の感度、幅広い分子量、サイズ、濃度を提供し、機能を強化するための構成やオプションモジュールの選択肢も豊富です。


SEC-MALSとしての使用

DAWNはゲル浸透クロマトグラフィー(GPC-MALS)、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC-MALS)、フィールドフローフラクショネーション(FFF-MALS)と組み合わせて、標準物質とカラムによる較正曲線に依存せず、分子量、サイズ、組成分布を測定するために最も多く使用されています。


ASTRA®に対応

DAWNには、オンライン多角度光散乱および動的光散乱の分析に使用できる最も汎用性の高いソフトウェアパッケージであるASTRAを付属しています。

概要

DAWNと付随のOptilab®dRI検出器は、MALS分析のベンチマークとして確立されており、何千もの査読付き出版物に引用されています。多角度光散乱検出器は、信頼性の高い分子量分布や分子構造、分岐率、フラグメント、凝集体に関する情報を得るために、GPCやHPLC-SECと併用することが不可欠です。

DAWNとOptilabを用いたSEC-MALSは、rms半径Rgが10nm以上の合成高分子および天然高分子のコンフォメーションと分岐をキャラクタライズします。ViscoStar®示差粘度検出器を追加することで、Rg限界の10 nm以下の分子構造とサイズを分析し、Mark-Houwink桜田係数を決定できるGPCトリプル検出システムが構築されます。

UV/Vis吸光光度検出器とDAWN、Optilab屈折率検出器を組み合わせたUV-MALS-RIトリプル検出システムにより、コポリマーやタンパク質結合体(糖タンパク質、PEG化タンパク質、界面活性剤結合膜タンパク質等)の分析が可能です。サイズ決定のためのWyattQELS DLS モジュールを追加することにより、タンパク質のコンフォメーション解析が可能です。

  • 分子量: 200 Da~1000 MDa
  • 感度:10 ng/mL ,THF中の100 kDaポリスチレンにおいて、0.4 µg/mL,PBS中の BSA (66.4 kDa)において
  • Rgは10~500nm、特定形状モデルで最大1000nmまで対応
  • 超安定・高出力レーザー

DAWNは、バッチ(オフライン)モードでも使用でき、未分割サンプルの重量平均分子量、z-平均サイズ、第2ビリアル係数をキャラクタライズすることが可能です。

DAWNは、 Calypso® CG-MALSシステムと組み合わせて、ラベルフリー、固定化なしの高分子相互作用、すなわち単純または複雑な分子系の自己および異種結合の親和性と絶対化学量論的特性を評価します。また、第二ビリアル係数、クロスビリアル係数、平均分子量、サイズの測定も自動化されています。

超音波洗浄機能内蔵

各DAWNにはCOMET超音波振動子が内蔵されており、液体を攪拌してガラス表面の粒子をほぐし、フローセルを自動的に洗浄します。

温度制御モデル

  • 室温モデル
  • 超高温(UHT)モデル、室温~+210 °Cまで。
  • 標準ペルチェ加熱/冷却(H/C)モデル、温度制御範囲:-15 °C ~ +150 °C

動的光散乱

WyattQELS- DAWN内部に内蔵された動的光散乱(DLS)検出モジュールで、同じ散乱体積でDLS測定を同時に行うことができます。光ファイバーは、50.5°、90°、135°、150°の4つの角度位置のいずれかに配置することができます。ASTRAソフトウェアが自動的に占有位置を検出します。

DynaPro® NanoStar® IIMobiusは、バッチ式とオンライン式の2つのDLS装置として使用することができます。MALSフローセルから直接集光するため、質量とサイズの相関は無分散のままです。

温度制御モデル

  • 常温モデル
  • 超高温(UHT)モデル、常温~+210 °Cまで。
  • 標準ペルチェ加熱/冷却(H/C)モデル、温度制御範囲:-10 ℃~+120 ℃。

超高温DAWNは、東ソーEcoSEC GPC-HTPolymer Char GPC-IRなどの高温GPCシステムとのインターフェイスを備えています。

DAWN-Polymer Char GPC interface
DAWN-Polymer Char GPCインターフェース

DAWN-Tosoh GPC-HT interface
DAWN-Tosoh GPC-HT インターフェース

レーザー波長

標準装備の658nmの赤色レーザーは、工場で785nmの赤外レーザーに交換することができます。赤外レーザーは、658nmの励起で蛍光を発するサンプルに対して正しい分子量と粒子径の測定を行うために、サンプルの蛍光を最小化または防止することができます。使用可能なレーザー波長については、Wyattまでお問い合わせください。ナローバンドパス蛍光遮断フィルターもご利用いただけます。

光学フィルター

DAWNには、オプションで偏光フィルターや蛍光遮断フィルターを装着することができます。蛍光フィルターは、レーザー照射により蛍光を発するサンプルの分析に威力を発揮します。

DAWNは、あらゆるタイプの標準的なGPC、HPLC、FPLCシステムの下流に設置して、分子量粒度 分布 (SEC-MALSを参照)、コンジュゲーションコンフォメーション解析などの派生分析を行うことができ、これらはすべてASTRAデータ収集・解析ソフトウェアで行えます。UV、RI、蛍光、その他の濃度検出器を備えたシステムでは、DAWNは最大4つのアナログ入力に対応しているため、サードパーティの濃度信号を取り込み、MALSによる分子量計算に使用することができます。DAWNは、一般的にUV検出器の下流とRI検出器の上流に設置されます。

ほとんどの場合、Optilab検出器を溶離液の流路に接続することが有効です。これにより、蛍光体や発色団に関係なく、普遍的な濃度検出が可能になります。同時に取得されたUVとRIの信号の組み合わせは、ASTRAの コンジュゲーション解析アルゴリズムで利用され、糖タンパク質、PEG化タンパク質、ブロック共重合体などの二元複合体をキャラクタライズすることができます。

また、DAWNはEclipseFFFシステムに接続し、FFF-MALSを介して1 nmから1 µmまでの高分子やナノ粒子のキャラクタライズを行うことも可能です。

SEC-MALS、FFF-MALSともに、動的光散乱(DLS)によるナノ粒子径測定のためのWyattQELSモジュールが追加されることがメリットとなります。WyattQELSは、MALS検出と同じレーザーとフローセル容積を利用します。光ファイバーは、4つの角度位置のいずれかに配置することができます。

天然高分子や合成高分子の分析には、ViscoStar も同様に追加することができます。示差粘度検出器は、分子量とコンフォメーションを決定する直交的な手段です。

MALS検出器は、分析に分離が有効でない場合、バッチモードで動作させることができます。

  • SECやFFFによる分離ができないサンプル(例えば、PMMAのような非常に大きく拡散性の高い高分子)の場合、重量平均分子量分子量とZ平均半径としてのサイズを測定します。
  • SEC-MALSの測定値を検証するため。
    • 大きな凝集体やその他の成分がカラムで濾過されるかどうかを判断する。
    • 可逆的な凝集体がカラムや分離チャンネルで希釈された後に解離するかどうかを判断する。
  • カラムシェアや希釈によって破壊された高分子やナノ粒子の複合体をキャラクタライズするため
  • タンパク質とリガンドの相互作用など、高分子の結合親和性や反応速度などを測定するため

Calypso - DAWNで組成グラジエント-MALSを実施・分析するための自動試料調製・供給システム。生体分子間相互作用、高濃度タンパク質間相互作用、Zimmプロット、dn/dc、時分割MALSなどの解析が可能です。相互作用解析にCALYPSOソフトウェアを使用します。

microCuvette - MALS検出器で、石英キュベットを使用した、静的および動的光散乱測定を同時に行うことができます。必要量はわずか10 µLです。

NanoFilter キット - 貴重なサンプルのろ過、回収、再ろ過を簡単に行うことができます。特に、サンプルの総量が300 µL以下の場合に有効です。

Microbatch キット - MALS検出器のフローセルへのサンプル注入や、RI検出器によるdn/dc測定に使用します。

ASTRA - クロマトグラフィー、フィールドフローフラクショネーション、バッチモードでのMALSおよびDLS分析のための当社の包括的なソフトウェアソリューションです。

ASTRAは、カスタマイズされたレポートや、オプションで21 CFR Part 11に準拠したセキュリティおよびデータベースパッケージなど、基本的な分析から高度な分析まで幅広く対応しています。

オプションのHPLC CONNECTソフトウェアは、HPLCシステムとWyatt検出器間の完全なデジタル同期を行い、HPLCスタックの統合制御を提供します。これらはすべてASTRAで対応できます。

HPLC Manager

ASTRAのMethod Builderは、最も一般的な解析のためのメソッドの仕様を、直感的な3ステップで簡素化します。

  1. 科学的アプリケーションを選択する
  2. 機器の指定
  3. サンプルとランのパラメータを入力する

ASTRAのワンクリックMW™機能、自動化されたマルチシーケンス処理、およびHPLC / UHPLC統合により、生産性を最大化します。 ASTRAは:

  • データ収集をHPLCまたはUHPLCと同期します
  • MWと半径を決定するためのデータの自動処理
  • カスタムレポートとグラフを生成する
  • 次の実行の準備
測定  
分子量範囲 200 Da~1 GDa1
分子サイズ範囲 (Rg) ≈ 10〜500 nm、特定形状モデルで1000 nmまで対応可能
分子サイズ範囲 (Rh) フローモードでは0.5nm~300nm2、バッチモードでは0.5nm~1μm(WyattQELS DLSモジュールまたはDynaPro® NanoStar®+光ファイバー接続が必要)。
感度 10 ng , THF中の100 kDa ポリスチレンまたは 200 ng ,PBS中の BSA、標準 7.8 mm x 300 mm SEC カラムをを使用した場合。
流体  
適応可能溶媒 HPLCに使用可能な全溶媒に対応(水系、有機系)。接液部材質は、316ステンレス、石英ガラスまたはF2ガラス、Kalrezです。
光学系  
検出器  
   MALS 検出器 18の検出角度で高ゲイン、高ダイナミックレンジのフォトダイオードを実現。
   補助検出器 安定化フィードバック用のレーザーモニター、吸収性サンプルの信号補正とデータ品質評価用の前方透過モニター。
   ダイナミックレンジ 3,300,000:1
   動的光散乱検出器(オプション) WyattQELS動的光散乱モジュールは、DAWNシャーシ内に直接設置することができます。また、DynaPro NanoStarキュベットベースDLS装置やMobius DLS-ELS装置を光ファイバーを介してDAWNに接続することもできます。
レーザー特性  
   レーザー波長 658 nm ± 4 nm;  785 nm は蛍光を発するサンプルに使用するためのオプション波長。
   レーザー出力制御 10%〜100%までプログラム可能
フローセル 石英ガラス:溶媒の屈折率が1.50未満の場合に最適。F2:溶媒の屈折率が1.50以上の場合に最適
温調オプション 常温
加温/冷却(HC) -15 °C ~ +150 °C
超高温(UHT)室温~+210 °C
エレクトロニクス  
アナログ入力 24ビット分解能のアナログ入力4点。入力範囲 -10 V〜+10 V
アナログ出力 ユーザーが選択可能な測定チャンネルから2つのアナログ出力 -10 V~+10 V
その他の入出力 アラーム入力、アラーム出力/再送信、自動注入入力、自動注入コンタクトクロージャー再送信、リサイクル入力/出力 (operates Orbit リサイクルバルブを動作させる)
コンピュータインタフェース  イーサネット
フロントパネル表示 10.1インチ(257mm)、マルチタッチ機能付き静電容量式高解像度スクリーン、信号、グラフ、機器設定、診断結果を表示
寸法 58cm(L) × 36cm(W) × 26cm(H)

1dn/dc、試料濃度、クロマトグラフィー条件により異なりますが、典型的な値です。

2上限は構成や流速に依存します。


ホストPCの要件は、「コンピュータの要件」に記載されている場合があります。

仕様は予告なく変更されることがあります。

その他のMALS機器

miniDAWN, molar mass determination, molar mass measurement, molar mass analysis, molecular weight measurement, molar mass characterization


miniDAWN®
- DAWNに次ぐ高感度。3角度に検出器を搭載し、200 Daから10 MDaまでの分子量と10~50 nmの半径を測定します。室温環境下でのみ使用可能

microDAWN® - UHPLC用の最初のMALS検出器で、検出器間の分散はわずか1.5 µLです。3角度に検出器を搭載し、200 Daから20 MDaまでの分子量と10 - 50 nmの半径を測定します。室温環境下でのみ使用可能。

ultraDAWN - 多角度光散乱を測定し、その結果(重量平均分子量Mwとrms半径Rg)をリアルタイムで報告します。

https://www.wyatt.com/ja/products/request-product-info.html